Alignment 和Carlibration 是什么意思?
流式细胞仪的质控,经常会碰到Alignment和Carlibration两个词,客户经常会被绕糊涂,它们的区别究竟是什么?今天给大伙聊一下。
Alignment(对准):检查仪器的激光器性能。即经过一段时间后,激光器是否失去对准或是发射功率和强度不够,它主要与 CV 和 MFI 亮度相关。
Carlibration( 校准): 检查仪器的分析能力是否正常。这包括仪器在整个动态范围内读取能力、区分群体的能力等。
在质控球的具体选择上,我们一般用RCP-30-5A 8峰球来做校准(Carlibration), URFP-30-2 单峰球做对准(Alignment)。
Aagrisera的抗体在复溶的时候需要加甘油吗?
不同的抗体有不同的要求。请严格按厂家的说明书来操作。一般地,不需要加甘油,直接加水复溶,除非厂家有特殊标识。
Agrisera的抗体绝大多数为冻干粉,可以在常温下运输,收到后,保存到-20度,可保质 5-6年。
铕荧光球可以在410nm激发吗?
有客户问铕荧光球可以在405nm激发吗?
的确有些厂家的铕荧光球既能在365nm激发,也能在410nm激发,610nm发射(检测)。但就我们提供的产品,基本上是365nm激发的。
Quantum™ FITC-5 MESF (#555) Quantum™ FITC-5 MESF (Premix)有什么区别?
荧光定量试剂盒Quantum™ FITC-5 MESF 有两种,一个货号是555, 一个是555p。
555是以6管形式提供:1 管空白,5管荧光球(1种荧光强度1个管, 5个强度5个管)。
555P 是以预混形式提供: 1 管空白,1 管各种荧光强度的微球混在一起。
抗体标记的微球中经常看到Crossabsorbed,其含义是什么?
有时候,我们会看到二抗标记的微球中有一个 Crossabsorbed, 有的没有。其区别在什么?
下面以 Spherotech 的MPXA-60-5 和MP-60-5 来说明。二者都是表面标记有羊抗鼠(HL)的聚苯乙烯微球,直径为6-8微米。
MPXA 是指在微球有生产过程中,多了一步处理:即用牛、人的抗体对微球进行了封闭,微球以非常高的特异性结合小鼠的抗体。而MP没有这一步。
在使用过程中,如果用户是简单纯化/提取/移除抗体,我们建议选MP;如果对特异要求很高,建议选MPXA。
Krytox-PEG-Krytox (KPK) surfactant是什么?
有客户问:在文献上看到“Krytox-PEG-Krytox (KPK) surfactant was purchased from Ran Biotechnology (Beverly, MA)”,请问这是什么化合物?
RAN Biotech的创始人Dr.Roger 与我们确认:就是008-FluoroSurfactant。
NIST微球聚沉怎么办?
NIST标准粒子是检测过程严格遵循美国国家标准局(NIST)提供的流程,可溯源至NIST标准尺和标准微球,常用在尺度仪器的精密校准上。金沙登陆入口可提供纳米至微米级的全系列产品。
有客户问,在用去离子水稀释NIST微球时,通常必须使用表面活性剂来减少微球之间的疏水相互作用, 常见的是添加SDS或聚山梨酯20(Tween-20)。 浓度范围0.01-0.1%,常见浓度为0.05%。SDS是阴离子的,而Tween-20是非离子的,相同浓度下更有效有聚沉,大直径微球尤其明显。
磁珠可以超声吗?
磁珠的密度比较大,或是因为保存不当,容易聚沉。在分散时,有客户问,是不是可以像聚苯乙烯微球一样超声?
答案是,我们建议不要超声。磁珠的四氧化三铁晶体(或是Gamma型三氧化二铁)是杂在基质或是为核包裹在微球内部,超声时,如果功率过大,会导致磁珠破裂,氧化铁泄漏。